上海厭氧培養(yǎng)箱技術培養(yǎng)方法和條件
生產甲烷菌液的準備:采用厭氧培養(yǎng)箱技術,分別取上述土壤1G,以甲醇為基質,富集培養(yǎng)1周,氣相色譜檢測有CH4產生,然后將菌液搖勻,采用10倍法用無菌水稀釋到,菌種選擇的菌液備用。
藥液培養(yǎng)劑的配制:將一定量已知濃度的甲胺磷和乙草胺標準液分別加入已滅菌用以培養(yǎng)產甲烷菌的液體培養(yǎng)基中,配制成藥液培養(yǎng)基。
培養(yǎng)方法和條件:每支培養(yǎng)管用5ML無菌注射器分裝4.5ML藥液培養(yǎng)基,1個濃度為1個處理3次重復。設添加無菌水為對照,每支培養(yǎng)管的培養(yǎng)基中先后加入無菌的混合液,維持培養(yǎng)液的氧化還原電位,每ml16萬單位的無菌青霉素溶液甲醇,不同稀釋度的菌液厭氧培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)后,分批檢測產甲烷菌數(shù)量及每支試管的產甲烷量。